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進口的胎牛血清:過濾分裝前很少會反復凍融,生產后的成品也是清澈的,進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,表現為稀薄、清淡,而國產血清,因為絕大多數是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,好的血清應是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。1、如發現血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質變性,若棕紅色,說明血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現象。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明采集血液的牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白,標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。胎牛血清可以提供細胞生長所需的天然元素或天然的生長因子。瑞安RPMI 1640 Medium
小牛血清和胎牛血清有何區別與注意事項?來源不同:胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采集血液獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、元素及其他活性物質等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時,應先將血清至于2-8℃冰箱,并經常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,基本不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應按用量分裝并于-20℃保存,避免反復凍融。瑞安RPMI 1640 Medium胎牛血清極低內有害元素,達到特級標準,使細胞更健康,實驗更順利。
使用胎牛血清的注意事項:注意解凍的方法,再高質量的胎牛血清也要在使用的時候堅持謹慎的原則,因此在解凍血清的時候,要細心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點,事先為血清預留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發生污染或者容器凍裂的情況。另外更好采用分步解凍的方式解凍血清,即先利用冰箱或冷庫將其溶解滿幾天,之后在室溫下全溶后再進行分裝。胎牛血清的滅活,一般是用水浴加熱的方式來加熱已經完全解凍的血清,那么需要注意的是,加熱的過程中一定要規則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做,是為了能夠讓血清中的補體成分去活化。不過胎牛血清的滅活并不是強制的要求,客戶可以自行選擇是否進行滅火處理。
為什么血清具有批次間可變性?血清是從生物來源提取的,其成分會存在批次之間的差異。為了盡可能減少應用變化,我們對每個批次均執行嚴格的質量檢測,使用高質量標準,盡可能確保批間一致性。胎牛血清的顏色和我之前使用的批次不同,會影響血清使用效果嗎?血清的顏色取決于血紅蛋白濃度,而該參數的差異不會影響血清的性能。為什么血清的來源很重要?血清的來源(或原產地)是指收集未加工血液的國家。不要與血清分離、過濾或其他加工處理所在國家混淆,二者可能是不同的。血清供應商的CoA文件應該明確寫明血清原產地和加工信息。胎牛血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、元素、無機物等。
我們都知道干細胞是十分脆弱的,培養干細胞大多使用胎牛血清來完成實驗。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質更高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分更少。優良的胎牛血清不僅為細胞提供細胞生產提供不可替代的營養成分,也會讓細胞培養實驗更輕松。提供細胞生長所需的天然元素或天然的生長因子。提供天然的結合蛋白,能識別氨基酸、脂質、金屬離子和元素等,能結合并調節它們的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并對細胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多個鈣離子結合位點,因而能調節和維持血清中的鈣離子濃度。胎牛血清應該存放在-20℃環境的地方。瑞安RPMI 1640 Medium
胎牛血清起酸堿度緩沖液作用。瑞安RPMI 1640 Medium
胎牛血清使用中的常見問題:如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。瑞安RPMI 1640 Medium
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