文章中心ARTICLE CENTER
在發展中求生存,不斷完善,以良好信譽和科學的管理促進企業迅速發展產品中心
PRODUCT CATEGORY相關文章
RELATED ARTICLES
詳細介紹
因此只有在活細胞內才會產生長發生光現象,并且發光光強度與標記細胞的數目線性相關。結構與性能熒光素在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發生反應,生成氧化熒光素(oxyluciferin),并產生長發生光現象。熒光素是腹腔注射或尾部靜脈注射進入小鼠體內的,約一分鐘就可以擴散到小鼠全身。熒光素的半衰期約三個小時,只有活細胞才能夠持續表達熒光素酶。(1)熒光素不會影響動物的正常生理功能。(2)熒光素是280道爾頓的小分子,水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透細胞膜和血腦屏障。(3)熒光素在體內擴散速度快,可通過腹腔注射或尾部靜脈注射進入動物體內。腹腔注射擴散較慢,持續發光長。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達熒光素酶的細胞開始發光,10min后強度達到穩定的更高點,在更高點持續約20~30min后開始衰減,約3h后熒光素排除,發光全部消失,更佳檢測時間是在注射后15~35min之間;若進行熒光素靜脈注射,擴散快,但發光持續時間很短。科研人員根據大量的實驗總結出熒光素的合適的用量是150mg/kg,即體重20克的小鼠需要3毫克的熒光素。(4)觀察時間的間隔沒有更短限制,只要觀察的條件控制一致就可以。雖然底物在動物體內有一定的代謝過程。D-熒光素有時候也叫游離酸。蘇州體外研究D-熒光素鉀鹽發射波長
注意事項1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin)、螢光素鉀鹽只是不同別名,以CAS號115144-35-9為準。2)注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3)如果要進行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。4)為避免反復凍融,本產品配制成溶液后建議適當分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化,如有條件,可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存。5)對于檢測靈敏度要求特別高的實驗,建議使用新鮮配制的本產品。6)在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時,應使用無鈣鎂離子的DPBS,因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,從而影響檢測。7)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。8)本產品只作科研用途!蘇州體外研究D-熒光素鉀鹽發射波長D-熒光素鉀鹽的合作平臺有哪些?
熒光素也就是FDAFDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發和發射波長分別為488nm和530nm。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統稱,其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyralis的螢火蟲體內的熒光素酶。在相應化學反應中,熒光的產生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應的速率非常慢,而鈣離子的存在常常可以進一步加速反應(與肌肉收縮的情況相似)。[1]熒光生成反應通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉化為光,剩余的能量都變為熱能而被浪費。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產生熒光的底物和其對應的酶的統稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發光反應。
熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產生生物發光的酶的統稱,其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(Fire?y)和海腎(Renilla)體內的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉錄活性調控及miRNA靶基因驗證等方向研究。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,該蛋白質不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度(體內)甚至沒有毒性,可用于原核和真核細胞。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒(12518)使用無DTT**配方來定量活細胞和細胞提取物中的螢光素酶活性。該測定基于螢火蟲熒光素酶,螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,可催化熒光素的兩步氧化,在560nm處產生光。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒特點:具有優化的“混合讀取”測定規程,可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度。D-熒光素鉀鹽使用的注意事項。
海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒提供了一種快速,靈敏的方法,可以使用專有的發光配方在基于細胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,與海腎螢光素酶相互作用后,該試劑產生具有強光的產物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點:該測定法與標準細胞生長培養基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分。熒光素酶是生物體內催化熒光素等物質氧化發光的一類酶的總稱。自然界中,不同的發光生物擁有不同的熒光素酶,除了螢火蟲熒光素酶(FireflyLuciferase)之外,還有發光細菌體內的細菌熒光素酶、發光海星的海星熒光素酶等。目前,人們對螢火蟲熒光素酶的研究**多、應用***。一則關于手機上的細菌的新聞里,**在用ATP熒光檢測儀檢測手機表面的細菌。ATP是一種在動物、植物和細菌等活細胞中都存在的能量物質,由前述的反應式可知,ATP與熒光素、熒光素酶反應發出熒光。檢測樣品中的微生物越多,ATP就越多,熒光反應的光亮就越大。做D-熒光素鉀鹽測試真的靠譜嗎?蘇州體外研究D-熒光素鉀鹽發射波長
D-熒光素鉀鹽的測試方法有哪幾種?蘇州體外研究D-熒光素鉀鹽發射波長
具體實驗流程:注:該操作流程通常用來檢測轉染了螢火蟲熒光素酶基因的真核細胞中熒光素酶表達的活性,不適用于對細菌熒光素酶進行檢測。1.實驗***天,消化并接種細胞(根據具體實驗選擇合適的細胞)于35mm細胞培養皿,置于5%CO2、飽和濕度的37℃培養箱內培養過夜。2.等細胞密度達到70%時用Luciferase報告基因質粒、LacZ的表達質粒及其它質粒(根據具體實驗確定)共轉染細胞(根據具體實驗選擇轉染方法,如磷酸鈣沉淀法、PEI、lipofectamine2000等均可)。3.轉染24-36h后,吸取培養液,用預冷的PBS(無鈣和鎂離子)洗滌細胞。注:熒光酶的酶促反應會被痕量的鈣所抑制,故用磷酸鈣轉染的細胞在收集細胞前應充分洗滌除去含鈣介質。4.在每個培養皿中加入350μl預冷的harvestbuffer,于4℃或冰上放置10min裂解細胞。5.在細胞裂解期間,準備足量的ml微量離心管,將ATPbuffer與luciferinbuffer以1:,每管100μl。6.依次取等體積的細胞裂解液(100μl)至步驟5中的離心管中,迅速混勻,在發光儀(Luminometer)上讀取吸光值。注:發光反應會迅速衰減,將細胞裂解液加入反應液后5s內必須讀取吸光值。7.確保以相同操作手法讀取全部樣品吸光值后。蘇州體外研究D-熒光素鉀鹽發射波長
南京翌科生物科技有限公司總部位于仙林街道緯地路9號江蘇生命科技園F7棟301-3室,是一家翌科生物基于團隊十余年的研發基礎,建立了行業前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉化平臺。公司目前擁有豐富的產品線,包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑、轉染試劑、microRNA 表達文庫、臨床大數據庫及涵蓋分子、細胞、動物的綜合科技服務等 100 多種試劑和科研外包服務。公司堅持國產試劑自主研發,服務全國各級高校、研究所、醫院、第三方檢測機構、生物醫藥公司等數千家客戶。的公司。翌科生物擁有一支經驗豐富、技術創新的專業研發團隊,以高度的專注和執著為客戶提供外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測試劑,轉染試劑。翌科生物不斷開拓創新,追求出色,以技術為先導,以產品為平臺,以應用為重點,以服務為保證,不斷為客戶創造更高價值,提供更優服務。翌科生物始終關注商務服務行業。滿足市場需求,提高產品價值,是我們前行的力量。
產品咨詢