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將膠質瘤干細胞(3×105)接種至6孔板中,然后使用riboFECTCP轉染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉染進膠質瘤干細胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率。結果發現DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為53.21%、47.46%和46.31%。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產生轉染混合物。然后將混合物加入DMEM(siRNA濃度:50nM)中,與原代小膠質細胞培養48h。RT-PCR和westernblot分析檢測轉染效率。結果發現轉染TREM-1siRNA后******了OGD誘導的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上調。無論有無血清、***存在均可獲得很高的轉染效率。神經細胞轉染試劑原理
siRNA,加入HiperFect轉染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養皿中混勻,培養細胞直到適當的時候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉染”,方便至極。當然,習慣用傳統方法也是可以的,只要培養到細胞匯合度50%—80%進行轉染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾,HiperFect真的是將實驗簡化到了***。適合多種細胞類型:HiPerfect可高效轉染多種細胞類型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細胞,產品手冊中列出了轉染原代HUVEC、成纖維細胞、角質細胞、上皮細胞和平滑肌細胞的操作步驟,貼心神經細胞轉染試劑原理試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現靶向敲低。
轉染產品知多少:轉染試劑選擇工具收錄于話題轉染是將核酸導入真核細胞中的過程,是細胞生物學、基因表達和基因***實驗中的關鍵步驟。不同的實驗方案和技術差別巨大,我們可以利用化學方法或脂質體將核酸(DNA或RNA)高效輸送到細胞內,也可以使用電穿孔方法利用電流在細胞膜上開孔,使核酸進入細胞內。賽默飛提供了多種高質量的轉染產品,適用于各種細胞類型的轉染。如何選擇**受信賴的可用于轉染的系統,是實驗結果的重要影響因素。
十全十美難,十全九美卻可以通過選擇一款好的轉染試劑來實現。理想的轉染試劑包括要具有較高的轉染效率,細胞毒性低,操作簡單可重復,價格還要可愛。現在大多數實驗室用的是脂質體系列轉染試劑,但脂質體對細胞毒性大,某些細胞的轉染效率還很低,看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉染RNA方面,脂質體的劣勢較明顯。QIAGEN在轉染試劑領域的研發思路與其核酸純化領域的精而專,全而深不同。在轉染試劑的研發過程中,另辟蹊徑,研精致思進而做到小而美的轉染產品。從市面上眾多轉染試劑的一片紅海中,神奇的開辟出一塊藍海,為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉染試劑私房菜。一般會同時設置對照,對RNAi結果進行比較。RNAi的成功取決于正確導入合適量的siRNA,達到比較大預期反應。
細胞轉染過程X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數據。2.操作簡便、節省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優化工作。細胞轉染必備——高效低毒轉染試劑.神經細胞轉染試劑原理
臨床級******毒載體生產必備轉染試劑..神經細胞轉染試劑原理
LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養基轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。神經細胞轉染試劑原理
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