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胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是指在健康母牛正常分娩前采集胎牛血液加工而成的血清,由于血清采集時間早,其胎球蛋白較多,血清白蛋白含量高,而γ-球蛋白含量極低,并富含多種生長因子,因此,是培養細胞更為優良的牛血清。牛血清的成分復雜,主要包含蛋白質、多肽、元素、氨基酸、葡萄糖等多種營養成分。雖然其中大部分成分已為人知,但還有一部分也還不清楚,而且其組分及含量常依動物性別、年齡、生理狀態、營養條件不同而有差異。血清理含有促進細胞生長的成分外,同時含有內有害元素、血色素、補體、抗體等其他有害成分,影響細胞生長甚至導致細胞死亡,因此,通常需要測試工作才知道對細胞生長的效果。低質量的血清常被病毒、菌體和支原體等微生物傳染,導致細胞培養失敗,浪費了科研人員的時間和精力。胎牛血清可以提供細胞生長所需的天然元素或天然的生長因子。RPMI 1640培養基(無硝酸鈣)
胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清營養成分完全而豐富,代謝產物極少,微生物傳染的可能性更小,品質更高,是組織細胞培養和病毒增殖時的重要營養來源。在細胞培養過程中,經常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲),更常使用的胎牛血清(澳洲)濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續實驗的結果,在實驗中使用10%的澳洲胎牛血清培養293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲),要根據具體細胞選擇合適的胎牛血清(澳洲)濃度。RPMI 1640培養基(無硝酸鈣)胎牛血清極低內有害元素,達到特級標準,使細胞更健康,實驗更順利。
胎牛血清的保存方法:1、需要長期保存的胎牛血清須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會被破壞,而影響血清質量。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。3、胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。
胎牛血清的作用有哪些?保護細胞,胎牛血清可以為生日包的生長提供一些重要的元素,同時可以為身體提供蛋白質,能夠識別維生素和一些其他的物質,因此能夠比較好的來處理一些有害物質。這個產品也可以提供蛋白酶的抑制劑,可以使細胞傳代時,將剩余的胰蛋白酶失去活性,因此能夠起到保護細胞不受到傷害的作用。胎牛血清是一個比較先進的產品,也是一個比較先進的研發成果,目前的生產成本是比較高的,所以在市面上的價格并不會太便宜,根據了解目前的銷售價格可能需要2000多元,所以大家看到幾百元的產品要慎重的購買,當然可能也會與規格的大小有密切的關系。胎牛血里的生長因子適合牛體內各種細胞生長,通常在8個月胎齡后慢慢消失。
胎牛血清、新生牛血清、小牛血清區別三者之間的區別:1、采集血液時間不同,胎牛血清(FetalBovineSerum)是在母牛懷孕5-8個月時,通過胎牛心臟穿刺采集血液獲取的血清。新生牛血清(NewbornCalfSerum)是來自剛出生~出生后2周內的新生牛靜脈取血。小牛血清(CalfSerum)采自出生后2周至1年內的小牛靜脈取血。2、組份與比例不同,兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、元素及其他活性物質等組份與比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎發育所必需的生長因子。一些生長因子到胎牛10個月時就消失了。用途與用法不同,某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可。使用濃度一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。胎牛血清經過細胞培養和雜交瘤細胞培養驗證。RPMI 1640培養基(無硝酸鈣)
胎牛血清全程冷鏈運輸,無凍融現象。RPMI 1640培養基(無硝酸鈣)
細胞和組織培養為什么需要使用血清?血清通常作為補充劑,以2-10%的濃度加入培養基中,為細胞提供綜合營養、元素、生長和附著因子。血清還可作為細胞培養系統的緩沖液,避免各種因素(包括pH變化、蛋白水解活性或重金屬、內毒等)干擾細胞生長或產生毒性作用。血清是如何加工的?血清采集后冷凍運輸至加工工廠,解凍并檢測細菌、病毒、內有害元素和血紅蛋白含量等多項指標。選擇更優良的血清在無菌環境下進行系列膜過濾無菌處理,然后在無菌環境下進行分裝并快速凍存于-20°C,在所有批次驗證達到或找過QC標準之前隔離存放。RPMI 1640培養基(無硝酸鈣)
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